1. 吸收曲線的制作

用吸量管移取1.000 × 10-3 mol·L-1鐵的標(biāo)準(zhǔn)溶液10.00 mL于50 mL容量瓶中，用吸量管依次加入10%的鹽酸羥胺溶液1 mL，搖勻，加0.15%鄰二氮菲溶液2 mL，1 mol·L-1 NaAc溶液5 mL，以水稀釋至刻度，搖勻。在分光光度計(jì)上用 l cm 比色皿，以試劑空白為參比溶液，在440～560 nm 間，每隔10 nm測(cè)定一次吸光度，以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制吸收曲線，找出最大吸收波長(zhǎng)λmax。

2. 顯色劑濃度的影響

取7只50 mL容量瓶，用吸量管依次加入1.000 × 10-3 mol·L-1的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液2.00 mL和10%鹽酸羥胺溶液1 mL，搖勻，分別加入0.15%的鄰二氮菲溶液0.10 mL，0.30 mL，0.50 mL，0.80 mL，1.00 mL，2.00 mL，4.00 mL，然后加入1 mol·L-1 NaAc溶液5 mL，以水稀釋至刻度，搖勻。在分光光度計(jì)上，用 l cm 比色皿，在最大吸收波長(zhǎng)下，以試劑空白為參比溶液，測(cè)定以上七個(gè)溶液的吸光度。以鄰二氮菲的體積 （mL） 為橫座標(biāo)，相應(yīng)的吸光度為縱座標(biāo)，繪制吸光度－顯色劑用量曲線，找出在測(cè)定中應(yīng)加人的顯色劑的體積（mL）。

3. 有色溶液的穩(wěn)定性

在50 mL容量瓶中，用吸量管依次加入1.000 × 10-3 mol·L-1鐵的標(biāo)準(zhǔn)溶液2.00 mL，10% 的鹽酸羥胺溶液1 mL，0.15%的鄰二氮菲溶液2 mL，l mol·L-1的NaAc溶液5 mL，以水稀釋至刻度，搖勻。立即在所用波長(zhǎng)下，用 l cm 比色皿，以相應(yīng)的試劑空白為參比，測(cè)定吸光度，然后放置5 min，l0 min，30 min，1 h，2 h，3 h，測(cè)定其吸光度，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制吸光度－時(shí)間曲線，找出絡(luò)合物穩(wěn)定的時(shí)間范圍。

4. 溶液酸度的影響

在9只50 mL容量瓶中，用吸量管依次加入1.000 × 10-3 mol·L-1的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液2.00 mL，10%的鹽酸羥胺溶液1 mL，0.15%的鄰二氮菲溶液2 mL，再分別加入l mol·L-1的NaOH 溶液 0.00 mL，0.20 mL，0.50 mL，0.80 mL，1.00 mL，1.50 mL，2.00 mL，2.50 mL，3.00 mL，以水稀釋至刻度， 搖勻。用精密pH 試紙或pH 計(jì)測(cè)定各溶液的pH值。在所用波長(zhǎng)下，用l cm 比色皿，以各自相應(yīng)的試劑空白為參比，測(cè)定九個(gè)溶液的吸光度，以 pH 值為橫座標(biāo)，吸光度為縱座標(biāo)，繪制吸光度－pH曲線，找出測(cè)定的適宜pH范圍醫(yī)\學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

5. 工作曲線的繪制

在6只50 mL容量瓶中，用吸量管分別依次加入1.000 × 10-3 mol·L-1的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液0.00 mL，2.0 mL，4.0 mL，6.0 mL，8.0 mL，10.0 mL，再分別加入10%的鹽酸羥胺溶液1 mL，0.15%的鄰二氮菲溶液2 mL，1 mol·L-1 NaAc溶液5 mL，以水稀釋至刻度，搖勻。在所用波長(zhǎng)下，用l cm比色皿，以試劑空白為參比，測(cè)定各溶液吸光度，繪制工作曲線，并計(jì)算摩爾吸光系數(shù)。

6. 絡(luò)合物組成的測(cè)定（摩爾比法）

取9只50 mL 容量瓶，用吸量管依次加入1.000 × 10-3 mol·L-1的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液1.00 mL， 10%鹽酸羥胺溶液1 mL，依次加入1.000 × 10-3 mol·L-1的鄰二氮菲溶液1.00 mL，1.50 mL，2.00 mL，2.50 mL，3.00 mL，3.50 mL，4.00 mL，4.50 mL，5.00 mL，然后各加入1 mol·L-1 NaAc 溶液5 mL，用水稀釋至刻度，搖勻。在所用波長(zhǎng)下用l cm比色皿，以各自試劑空白為參比，測(cè)定各溶液的吸光度，以吸光度為縱座標(biāo)，以CR/CM為橫座標(biāo)，繪制曲線。根據(jù)曲線上前后兩部份延長(zhǎng)線的交點(diǎn)位置，確定反應(yīng)的絡(luò)合比。

7. 鐵含量的測(cè)定

準(zhǔn)確移取10.0mL未知液，按工作曲線的測(cè)定步驟，測(cè)定其吸光度，從工作曲線上求出未知液中Fe的含量（mg·mL-1）。

注：由于本實(shí)驗(yàn)所使用的鄰二氮菲、鹽酸羥胺、醋酸鈉、NaOH 等溶液，均為無(wú)色透明的水溶液，所以實(shí)驗(yàn)中所有參比溶液，均可使用蒸餾水。